純化水微生物限度檢查是確保水質安全的重要步驟，主要目的是確定水中微生物的數量和種類，以評估其是否符合相關標準和要求。下面小編就來介紹下純化水微生物限度檢查采用薄膜過濾法的操作流程。

　　純化水微生物限度檢查所需設備

　　（1）微生物限度檢測儀和培養箱、凈化工作臺。

　　（2）無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g、氯化鈉4. 0g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。

　　純化水微生物限度檢查分析步驟：

　　微生物限度檢查應在環境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。細菌及控制菌培養溫度為30～35℃;霉菌、酵母菌培養溫度為23～28℃。

　　細菌、霉菌及酵母菌計數

　　A 供試品檢查——薄膜過濾法

　　采用薄膜過濾法，濾膜孔徑應不大于0.45μm，直徑一般為50mm，若采用其他直徑的濾膜，沖洗量應進行相應的調整。選擇濾膜材質時應保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應采用適宜的方法滅菌。使用時，應保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品，其濾膜和濾器在使用前應充分干燥。為發揮濾膜的最大過濾效率，應注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個濾膜表面。供試液經薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml。總沖洗量不得超過1000ml，以避免濾膜上的微生物受損傷。 取相當于每張濾膜含1ml的供試液，加至適量的稀釋劑中，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計數方法的驗證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。

　　B 陰性對照試驗 取驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。

　　C 培養和計數

　　除另有規定外，細菌培養3天，霉菌、酵母菌培養5天，逐日觀察菌落生長情況，點計菌落數，必要時，可適當延長培養時間至7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不小于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。 一般營養瓊脂培養基用于細菌計數;玫瑰紅鈉瓊脂培養基用于霉菌及酵母菌計數;酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基用于酵母菌計數。在特殊情況下，若營養瓊脂培養基上長有霉菌和酵母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養基上長有細菌，則應分別點計霉菌和酵母菌、細菌菌落數。然后將營養瓊脂培養基上的霉菌和酵母菌數或玫瑰紅鈉瓊脂培養基上的細菌數，與玫瑰紅鈉瓊脂培養基中的霉菌和酵母菌數或營養瓊脂培養基中的細菌數進行比較，以菌落數高的培養基中的菌數為計數結果。 細菌、霉菌和酵母菌總數每1ml不得過100個。

需要注意的是，在微生物檢測過程中，一些因素可能會影響檢測結果的準確性。例如，缺氧、污染源、物種種類等因素都可能影響樣品的真實性。因此，在檢測過程中要嚴格控制這些因素，確保檢測結果的準確性。

總之，純化水微生物限度檢測是確保水質安全的重要措施。通過遵循嚴格的檢測標準和操作程序，可以有效地保證純化水的質量，從而保障其在各個領域的安全使用。